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搜索關(guān)鍵詞：

Cell apoptosis細(xì)胞凋亡；Mitochondrial membrane potential線粒體膜電位；MitoTracker；MitoSOX；JC-1；JC-10；Rhodamine 123；CAS：555-60-2；

基本介紹：

線粒體（Mitochondrial）是一種存在于大多數(shù)真核細(xì)胞中的由兩層膜包被的細(xì)胞器，約占細(xì)胞體積10%。作為一種多形細(xì)胞器，其結(jié)構(gòu)因細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞周期狀態(tài)意思胞內(nèi)代謝狀態(tài)而不斷變化。線粒體至關(guān)重要的功能是由氧化磷酸化（Oxphos）和脂質(zhì)氧化介導(dǎo)的能量產(chǎn)生。線粒體內(nèi)還參與其他幾種代謝活動(dòng)，包括尿素生成，血紅素和非血紅素鐵和類(lèi)固醇生物起源，以及胞內(nèi)鈣離子（Ca2+）穩(wěn)態(tài)。線粒體還在凋亡中發(fā)揮重要作用。目前對(duì)線粒體參與生理功能的了解只有很少一部分，而對(duì)其作用機(jī)理和調(diào)控方式的了解就更少。

線粒體（Mitochondrial）的分布依據(jù)細(xì)胞能量水平而變化，是細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞周期狀態(tài)和增殖情況的一種功能表現(xiàn)。比如，褐色脂肪組織細(xì)胞，肝細(xì)胞和某些腎上皮細(xì)胞富集存在于活躍線粒體中，而靜息免疫系統(tǒng)祖細(xì)胞或前體細(xì)胞使用線粒體選擇性探針染色率很低。阿爾茨海默病線粒體數(shù)目減少，且其蛋白和核酸易被包括一氧化氮在內(nèi)的活性氧（ROS）所攻擊造成損傷。

我司提供一系列線粒體選擇性熒光探針和有機(jī)染料，能夠用來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞器功能。大多數(shù)線粒體選擇性有機(jī)染料的攝取依賴(lài)于線粒體膜電位。因此這些染料能讓研究者標(biāo)記線粒體活動(dòng)、定位、含量，以及觀察一些能改變線粒體功能的某些藥物的生理效應(yīng)。

線粒體探針：

一、MitoTracker Probes（可固定的線粒體選擇性探針）

1）傳統(tǒng)線粒體探針的缺點(diǎn)：

傳統(tǒng)線粒體探針如羅丹明123（Rhodamine 123）雖然可立即聚集在功能線粒體上，然而，一旦線粒體膜電位喪失，這些探針就能很容易清洗掉離開(kāi)細(xì)胞。當(dāng)碰到細(xì)胞需要進(jìn)行醛類(lèi)固定或細(xì)胞內(nèi)含影響膜電位藥物的實(shí)驗(yàn)中，這些探針則受到限制，不可使用。

2）MitoTracker線粒體探針的優(yōu)點(diǎn)

Mitotracker正克服傳統(tǒng)探針的缺點(diǎn)而被生產(chǎn)，其能夠聚集在活線粒體上，并且細(xì)胞固定中也能良好維持。其中，Mitotracker orange，red，and deep red這三種探針經(jīng)透化（permeabilization）后仍能良好維持。在接下來(lái)免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、原位雜交（ISH）或電鏡實(shí)驗(yàn)的處理步驟中樣本仍保留線粒體的活細(xì)胞染色形態(tài)。另外，Mitotracker探針去除病原細(xì)胞線粒體染色可能遇到的一些問(wèn)題，因?yàn)橐坏┚€粒體染色后，細(xì)胞即可被固定然后進(jìn)行結(jié)果分析。

3）MitoTracker線粒體探針產(chǎn)品

我們提供7種Mitotracker探針，它們?cè)诠庾V特性、氧化態(tài)以及可否固定幾個(gè)參數(shù)上有所差異，具體見(jiàn)下表。

【注1】：MitoTracker® Green FM（#M7514）在水溶液中無(wú)熒光；

【注2】：MitoTracker® Orange CM-H2TMRos（#M7511），MitoTracker® Red CM-H2XRos（#M7513）為還原態(tài)探針，無(wú)熒光。只有被氧化后才發(fā)熒光。

4）MitoTracker線粒體探針訂購(gòu)信息

以上所有產(chǎn)品均為L(zhǎng)ife（Invitrogen）原裝，原始包裝為20x50 µg（20支50µg單個(gè)包裝構(gòu)成）。我司對(duì)M7512，M7514，M22426進(jìn)行拆開(kāi)銷(xiāo)售，特惠價(jià)為350元/支，單支50µg；對(duì)M7513，單支優(yōu)惠價(jià)格為400元?，F(xiàn)貨銷(xiāo)售，歡迎訂購(gòu)。

二、MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator（線粒體超氧化物探針）

1）背景介紹

線粒體超氧化物（Mitochondrial superoxide）是氧化磷酸化的副產(chǎn)物。一條緊密偶聯(lián)的電子運(yùn)傳遞鏈中約1-3%被消耗的線粒體氧不能*被還原，這些‘遺漏’的電子能與分子氧快速反應(yīng)產(chǎn)生超氧陰離子，即線粒體中含量zui高的活性氧（ROS）分子。細(xì)胞過(guò)氧化物生成量的增加在心血管疾病中得到闡釋?zhuān)@些疾病包括高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化和糖尿病相關(guān)的血管損傷，以及神經(jīng)退化疾病如帕金森疾病，阿爾茨海默病和肌wei縮性[脊髓]側(cè)索硬化（ALS）。

2）產(chǎn)品描述

MitoSOX紅色線粒體超氧化物熒光探針（MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator）是二氫乙啶（dihydroethidum，DHE）的一種陽(yáng)離子衍生物，特別設(shè)計(jì)高度特異性檢測(cè)活細(xì)胞線粒體超氧化物。

MitoSOX Red是一種特異性靶向活細(xì)胞線粒體的新型熒光探針，具細(xì)胞膜滲透性，且能快速和選擇性結(jié)合線粒體。一旦進(jìn)入線粒體，被超氧化物氧化，與核酸結(jié)合后產(chǎn)生很強(qiáng)的紅色熒光。MitoSOX Red能夠立即被超氧化物，并不是其他ROS-或RNS（活性氮）生成系統(tǒng)氧化。超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）能夠預(yù)防MitoSOX Red被氧化。

MitoSOX Red可用于在對(duì)活細(xì)胞線粒體釋放的超氧化物的直接檢測(cè)中區(qū)別純化線粒體的人為誤差。另外，MitoSOX Red是一種有價(jià)值的工具，用來(lái)篩選多種疾病中調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的藥物。

3）產(chǎn)品特點(diǎn)

• 容易為超氧化物而不是其他的ROS、RNS生成系統(tǒng)氧化

• 吸收波長(zhǎng)⁄發(fā)射波長(zhǎng)zui大值：~510⁄580 nm

• 用于活細(xì)胞成像

  快速選擇性靶向線粒體

4）MitoSOX Red訂購(gòu)信息

以上所有產(chǎn)品均為L(zhǎng)ife（Invitrogen）原裝，原始包裝為10x50 µg（10支50µg單個(gè)包裝構(gòu)成）。我司對(duì)M36008進(jìn)行拆開(kāi)銷(xiāo)售，特惠價(jià)為650元/支，單支50µg，現(xiàn)貨銷(xiāo)售，歡迎訂購(gòu)。

三、JC-1/JC-10線粒體膜電位檢測(cè)探針（早期凋亡檢測(cè)）

1）背景介紹

線粒體膜通透性的改變是細(xì)胞早期凋亡發(fā)生的重要特征之一。

凋亡早期，線粒體膜通透性增加，線粒體蛋白包括：細(xì)胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G（EndoG）、凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）等，從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。細(xì)胞色素C的釋放伴隨著線粒體膜電位的喪失，呼吸鏈障礙，鈣離子的釋放。

線粒體膜電位的破壞是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后zui早發(fā)生的胞內(nèi)事件，目前常用一些親脂性陽(yáng)離子染料如JC-1，JC-10，羅丹明123（Rhodamine 123）等在線粒體膜電位變化中聚合形式的差異來(lái)區(qū)分正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞?；驹硎牵赫＜?xì)胞中陽(yáng)離子染料在線粒體中積累并聚合，聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光；凋亡細(xì)胞中由于線粒體膜電位的喪失，染料不能在線粒體中積累并以單體形式存在于胞漿中，單體發(fā)出綠色熒光。

2）產(chǎn)品描述

JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢(shì)依賴(lài)性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測(cè)，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè)，因線粒體的去極化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。

JC-10是JC-1的升級(jí)產(chǎn)品，優(yōu)勢(shì)在其比JC-1具更好的水溶性，特別適合替代需要更好染料濃度的實(shí)驗(yàn)。JC-10的檢測(cè)原理同JC-1。

3）訂購(gòu)信息

4）相關(guān)產(chǎn)品（凋亡誘導(dǎo)劑）

線粒體凋亡研究中常需要陽(yáng)性誘導(dǎo)劑建立陽(yáng)性的凋亡模型，從而用于細(xì)胞凋亡機(jī)理或凋亡相關(guān)藥物的篩選。

CCCP，即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone，一種質(zhì)子載體（H+ionophore），是一種強(qiáng)效的線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，促使線粒體內(nèi)膜對(duì)H+產(chǎn)生通透性，導(dǎo)致線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的膜電位喪失，誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。也可作用于葉綠體膜，抑制光合作用；CCCP還可抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體（ER-Golgi）之間的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)，高親和力結(jié)合細(xì)胞色素C氧化酶。

FCCP，即Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone，一種質(zhì)子載體（H+ionophore），也是一種強(qiáng)效的線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，促使質(zhì)膜和線粒體膜去極化。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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