iFluor 488 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽綠色 Actin熒光探針與細胞染色
簡要描述：
iFluor 488 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽綠色 Actin熒光探針與細胞染色，又稱鬼筆鵝膏素，Z初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七肽毒素，以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白），不會結(jié)合單體肌動蛋白（G-actin）。
產(chǎn)品時間：2017-08-27
打印當前頁iFluor 488 Phalloidin iFluor 488標記鬼筆環(huán)肽
產(chǎn)品標簽
Phalloidin 鬼筆環(huán)肽；F-actin 肌動蛋白（聚合）；G-actin 球形肌動蛋白（單體）；Actin Polymerization 肌動蛋白聚合；Cytochalasin細胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
iFluor 488 Phalloidin iFluor 488標記鬼筆環(huán)肽 | MX4410-300T | 300T | 1988 |
【溫馨提示】：見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品描述
鬼筆環(huán)肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素，zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七肽毒素，以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白），不會結(jié)合單體肌動蛋白（G-actin）。不像肌動蛋白抗體，同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環(huán)肽對大小纖維的親和力相近，在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細胞中，基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環(huán)肽分子的化學計量比結(jié)合。不像肌動蛋白抗體，對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml，可用作一種聚合增強劑。另外，產(chǎn)生的復合物高度穩(wěn)定（解離常數(shù)約3×10–8 M），能夠抑制細胞松弛素、碘化鉀和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。
鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色，且水溶性良好，是非常實用和方便的探針，對組織切片、細胞培養(yǎng)物或無細胞體系內(nèi)的F-actin進行定性和定量研究。另外，鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小，直徑約12–15 Å，分子量<2000 Da，經(jīng)標記后的F-actin仍維持許多標記前的功能。比如，標記的甘油抽提肌纖維仍能收縮；標記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質(zhì)中移動。
本品為iFluor 488熒光標記的鬼筆環(huán)肽（iFluor 488-Phalloidin），以溶于DMSO的儲存液形式提供，按照100µl/孔（96孔板），總共可做300次。
產(chǎn)品特點
1）選擇性染色F-actin，優(yōu)于抗體染色法，具更高的特異性和更低的非特異背景。
2）優(yōu)秀的熒光亮度和穩(wěn)定性，類同于Alexa Fluor 488-Phalloidin，Ex/Em=492/518。
3）優(yōu)化用于固定和透化處理樣本。
4）適用于多重標記應用，與其他熒光染料包括熒光蛋白、Qdot熒光納米晶和其他包括二抗在內(nèi)的熒光偶聯(lián)物*兼容。
注意事項
1）本品具有一定的毒性，LD50=2mg/kg，操作時請注意防護。
2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作流程（免疫熒光染色）【詳見懋康整理】
有幾種方法都能用來染色組織細胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動蛋白絲（F-actin）染色，其中，固定步驟在獲得可信且具代表性的細胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。
一、實驗材料準備
二、染色工作液準備
三、染色流程（以96孔板為例）
3.1 用黑框/透明底的96孔板進行細胞培養(yǎng)，使其貼壁生長達到70-80%的匯合度。
3.2 吸掉培養(yǎng)液，用37℃預熱的1×PBS Buffer（pH 7.4）清洗細胞2次。
3.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定細胞，室溫固定10-30min。【注意】：固定過程中甲醇能破壞肌動蛋白，因此，固定液中避免接觸任何甲醇。的固定液是無甲醇的甲醛。
3.4 用1×PBS Buffer清洗細胞2-3次，室溫下30s/次。
3.5 用破膜緩沖液透化細胞，室溫處理5min。
3.6 用1×PBS Buffer清洗細胞2-3次，室溫下30s/次。
3.7 取100μl 現(xiàn)配的iFluor 488 Phalloidin染色工作液到每個孔內(nèi)，室溫避光孵育30-90min。
【注意】：若有需要，此時可加入即用型PI染色液或其他不同于iFluor 405熒光光譜的細胞核染色液。
3.8 用1×PBS Buffer清洗細胞2-3次，室溫下30s/次。
3.9 加抗熒光淬滅劑（如Fluoromount-GTM，Cat# MM1401）到孔內(nèi)保護熒光。
3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果，選擇iFluor 488激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=492/518nm）。若做細胞核染色，選擇合適濾片，比如DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | Ex/Em | 分子量 |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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iFluor 488 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽綠色 Actin熒光探針與細胞染色
iFluor 488 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽綠色 Actin熒光探針與細胞染色