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EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:

EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是LexA系統(tǒng)酵母雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。轉(zhuǎn)化標(biāo)記為ura3,his3,trp1。報(bào)告基因?yàn)長(zhǎng)EU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用,分別為pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-20

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EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

溫馨提示

見(jiàn)我司(懋康生物)整理的酵母雙雜交(Yeast two-hybrid assay產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品標(biāo)簽

LexA雙雜交系統(tǒng);EGY48;Y2HGold;pGBKT7pLexA;Aureobasidin A AbA);金擔(dān)子素;

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

MF2358-1000UL

10×100μl

290

MF2358-5000UL

50×100μl

1320

產(chǎn)品包裝

組分編號(hào)

組分名稱

保存

貨號(hào)(規(guī)格)

MF2358-1000UL

MF2358-5000UL

MF2358-A

EGY48 Chemically Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2358-B

pGBKT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2358-C

Carrier DNA (10μg/μl)

-20

100μl 

500μl 

MF2358-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml

產(chǎn)品描述

酵母雙雜交系統(tǒng)是用于體內(nèi)研究蛋白相互作用的一種非常便利的工具,目前采用的有LexA系統(tǒng)和GAL4系統(tǒng)。在LexA系統(tǒng)中,DNA結(jié)合域(DNA- BD)由一個(gè)完整的原核蛋白LexA構(gòu)成,轉(zhuǎn)錄激活域(AD)由一個(gè)大腸桿菌來(lái)源的含88個(gè)氨基酸殘基的酸性肽B42構(gòu)成),在酵母中能活化基因的轉(zhuǎn)錄。正常情況,BDAD不會(huì)結(jié)合,將待檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與BDAD融合,形成誘餌融合蛋白(bait-DNA)和誘捕融合蛋白(prey-DNA),只有當(dāng)誘餌和誘捕蛋白發(fā)生相互作用,促使BDAD的相互接近,才能激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。

EGY48LexA系統(tǒng)酵母雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。轉(zhuǎn)化標(biāo)記為ura3,his3,trp1。報(bào)告基因?yàn)?/span>LEU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用,分別為pLexA、pB42ADp8op-LacZ。質(zhì)粒pLexA的篩選標(biāo)志為HIS3,用于表達(dá)誘餌融合蛋白。pB42AD的篩選標(biāo)志為TRP1,用于表達(dá)誘捕融合蛋白。報(bào)告質(zhì)粒p8op-LacZ的篩選標(biāo)志為URA3,報(bào)告基因?yàn)?/span>LacZ,報(bào)告基因UAS來(lái)源于LexA op (x6),只有當(dāng)誘餌(Bait)和誘捕(Prey)相互作用才能啟動(dòng)LacZ表達(dá)。

本品為經(jīng)特殊工藝制備的EGY48酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,用pGBKT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個(gè)月。

基因型

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 100 µl冰上融化的EGY48化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µgCarrier DNA 95-100 孵育5 min,快速冰浴。重復(fù)一次。)10 µl,PEG/LiAc 500µl,用槍吹打幾次充分混勻,30水浴30 min(在15min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
  2. 之后將管子放42水浴15 min(在7.5min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
  3. 5000 rpm離心40s棄上清,用400 µl ddH2O重懸沉淀,離心30s棄上清。
  4. 50 µl ddH2O重懸,涂板,放入29培養(yǎng)48-96 h。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

 

EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

EGY48酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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